产品描述
即用型的常规PCR预混合液，含有Taq DNA聚合酶、dNTP混合物、MgCl2以及优化的反应缓冲液。反应时只需加入引物和模板即可进行扩增。产品中含有溴酚蓝染料，PCR后可直接进行电泳。PCR产物具有3’-dA突出端，可轻松克隆至T载体。
产品特点
快 速：延伸速度达到15-30 sec/kb；
高 效：扩增长度可达8kb；
稳定性强：本产品含有优良的稳定剂，4℃可放置3个月，性能有保证；
T载体克隆：PCR产物具有3’-dA突出端，可轻松克隆至T载体；
高GC含量扩增：已验证70% GC含量的DNA片段可高效扩增。
促销活动
买10包送10包
买20包送30包
买60包送120包
惊爆促销 多买多送 快来带我走
常用反应体系（50μl）
组分
体积（μl）
2×Taq PCR Master Mix
25μL
上游引物
0.2-1.0μM（终浓度）
下游引物
0.2-1.0μM（终浓度）
模板DNA
1-50ng（质粒）；10ng-1μg（基因组）
ddH2O
至50μL
备注：Mg2+终浓度为2mM
扩增程序
扩增片段＜3K 扩增片段≥3K（推荐引物长度≥30bp）
94℃ 1 分钟 30 秒 94℃ 5分钟
94℃，20 秒 30次循环： 94℃，5 秒
30 次循环： 50～60℃，20 秒 68℃，60秒/kb
72℃，60秒/kb 72℃ 5分钟
72℃ 5分钟 4℃ 保温
4℃ 保温
使用建议：
1. 使用本试剂扩增得到的PCR产物3´ 端有一突出"A"碱基，可直接克隆于T载体中；
2. 需要溶解完全后使用，防止离子浓度不均匀；
3. 应根据实验目的选择合适的循环数，循环数过少，会造成扩增量不足；循环数过多，扩增量增加，但突变率也会增加，并造成非特异性扩增；
4. 根据引物 Tm 值设置合适退火温度，退火温度过低，会造成非特性扩增；过高可能扩增不到。
运输与保存：-20℃保存，冰袋运输。
质量保证：经检测无外源核酸酶残留，PCR 方法检测无大肠杆菌 DNA 残留，能有效扩增人基因组中的单拷贝基因。
应用实例
图例1）使用普通（A组）及含染料（B组）的2×Taq Master Mix配制的50μl扩增体系中，以5ngλDNA为模板，对500bp～6.0KB片段的扩增结果。
泳道1：500bp； 泳道2：1kb； 泳道3：2kb； 泳道4：4kb； 泳道5：6kb；泳道M：1kb DNA LadderI
图例2）50μl扩增体系中，分别以50ng～0.05ng人基因组DNA为模板，可对特定基因片段（380bp）进行很好的扩增。
泳道1：50ng；
泳道2：5ng；
泳道3：0.5ng；
泳道4：0.05ng；
泳道M：DNA Ladder 2000
常见问题（Q&A）
Q1. 使用PCR Master Mix扩增目的基因，琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物时，为什么会出现涂抹带？
A1：造成涂抹带的原因有很多，因PCR Master Mix预混有浓度优化的Mg2+浓度（3mM）和Taq DNA聚合酶，可着重从以下几个方面考虑：污染、模板量过多、引物特异性不高或退火温度过低、循环数过多、甚至模板GC含量过高等。可以通过以下方法尝试解决：设置阴性对照（NTC）确认是否污染；建立模板浓度梯度；提高退火温度或进行touch down PCR；减少循环数。
Q2. 使用PCR Master Mix扩增目的基因，琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物时，为什么无条带？
A2：PCR反应成败很大程度上依赖于高质量的DNA模板，我们建议进行阳性对照（引物已验证具备扩增能力），排除模板对PCR反应的抑制。另外，建议优化引物Tm温度和增加延伸时间。对于低丰度基因，建议增加循环数。
Q3. 为什么出现非特异性条带？
A3：大多数引物可直接使用55-60℃扩增，特异性良好。若出现非特异性扩增，建议优化引物退火温度。
全国科研机构使用多年 多年积累 多年经验 铸就高品质
