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柠檬酸钠抗原修复液(50×)

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DY30212 100ml 80.00
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柠檬酸钠抗原修复液(50×)

   细胞或组织用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后,会导致蛋白之间的交联,遮蔽样品的抗原位点,导致免疫染色时染色信号减弱,甚至出现一些假阳性染色结果。柠檬酸钠抗原修复液(50×)采用了广泛使用的柠檬酸钠缓冲液(pH6.0),可有效去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联,充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。其特别适用于石蜡切片,也可用于冰冻切片等其它样品。

   通常石蜡切片都需进行抗原修复处理,而冰冻切片可以不进行抗原修复处理。抗原修复会大大改善石蜡切片的免疫染色效果,但对于冰冻切片的染色效果很多文献资料表明也有显著改善。特别是当冰冻切片免疫染色效果欠佳时,可以考虑尝试进行抗原修复。从原理上来看,无论冰冻切片还是细胞爬片等,只要是用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定的样品,进行抗原修复都会有效去除蛋白之间的交联,充分暴露抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。

注意事项:

柠檬酸钠抗原修复液(50×)使用前必须用重蒸水或MilliQ水稀释50倍,配成抗原修复液(1×)

实验方法

1.石蜡切片

1脱蜡:切片在二甲苯中脱蜡2×5min。无水乙醇2×5min90%乙醇2×5min70%乙醇5min。蒸馏水2×5min

2抗原修复:将切片浸泡在抗原修复液(1×)中,95-100加热约10~20min(最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。抗原修复液(1×)使用前需预热到95-100。加热可以使用水浴锅微波炉。如果使用微波炉加热,需注意避免修复液暴沸。随后大约在20~30min冷却至室温。用免疫染色洗涤液洗涤1~2次,每次3-5min。即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。

2.冰冻切片:用免疫染色洗涤液洗涤切片5min抗原修复的过程如石蜡切片的抗原修复过程。

3.其它样品的抗原修复,可以参考石蜡切片的步骤进行

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